Əsas giriş
Eritrosit lizat qırmızı qan hüceyrələrini çıxarmaq üçün ən sadə və asan üsullardan biridir, yəni nüvəli hüceyrələrə zərər verməyən və qırmızı qan hüceyrələrini tamamilə çıxara bilən qırmızı qan hüceyrələrini lizatla parçalamaqdır. Lizat parçalanması, əsasən fermentlərin həzmi ilə dağılmış toxuma hüceyrələrinin ayrılması və təmizlənməsi, limfositlərin ayrılması və təmizlənməsi, qırmızı qan hüceyrələrinin toxuma zülalının və nuklein sınaqlarında çıxarılması üçün istifadə edilən yumşaq qırmızı qan hüceyrələrinin çıxarılması üsuludur. turşunun çıxarılması. Qırmızı qan hüceyrələrinin lizatı ilə əldə edilən toxuma hüceyrələrində qırmızı qan hüceyrələri yoxdur və daha sonra ilkin kultura, hüceyrə birləşməsi, axın sitometriyası, nuklein turşusu və zülalın ayrılması və çıxarılması və s. üçün istifadə edilə bilər.
İstifadəyə dair göstərişlər
Toxuma hüceyrə nümunəsi
1. Təzə toxumalar pankreas/ferment və ya kollagenaza tərəfindən həzm olundu və tək hüceyrə suspenziyasına səpildi və supernatant sentrifuqa ilə atıldı.
2. ELS lizatını soyuducudan 4-də götürün, 1:3-5 nisbətində hüceyrə çöküntüsünə ELS lizatını əlavə edin (1ml sıxılmış hüceyrəyə 3-5ml lizat əlavə edin), yumşaq üfürün və qarışdırın.
3. 5-8 dəqiqə ərzində 800-1000 rpm-də sentrifuqa edin və yuxarı qırmızı şəffaf mayeni atın.
4. Çökmüş hissə toplanmış və Hank məhlulu və ya serumsuz kultura məhlulu ilə 2-3 dəfə sentrifuqa edilmişdir.
5, krekinq tam/tam deyilsə, 2 və 3-cü addımlar təkrarlana bilər.
6. Sonrakı təcrübələr üçün resuspension hüceyrələri; Əgər RNT çıxarılırsa, bunu DEPC suyundan istifadə edərək 4-cü addımda hazırlanmış məhlulda etmək daha yaxşıdır
Qırmızı qan hüceyrələrinin həyat dövrü çox qısadır, cəmi 120 gündür, lakin onlar qanı çox tez çoxaldırlar və bu halda onlar xüsusilə hüceyrə bölünmə qabiliyyətinə malikdirlər və bütün hüceyrələr arasında ən sürətli bölünən hüceyrələrdir, ona görə də bu hüceyrə çox qiymətlidir, buna görə də hüceyrə mədəniyyəti üçün çox faydalıdır. Çox sadədir, onun tərkibində heç bir orqanoid yoxdur, sadəcə hüceyrə membranları və zülallar var.